质粒载体是什么？

质粒载体是基因工程重要的载体之一。它是以质粒 DNA 分子为基础构建而成，主要用 于原核生物和植物的基因转移以及建立基因组文库和cDNA 文库。现在分子生物学使用的质粒载体都已不是原来细菌或细胞中天然存在的质粒，而是经过了许多的人工改造，从不同的实验目的出发，人们设计了各种不同类型的质粒载体。近年来，随着基因操作技术的 发展，新的有特定用途的质粒不断出现，质粒载体已成为分子生物学领域内一个备受关注和 进展非常迅速的研究方向。

质粒的一般生物学特性

1.质粒的概念

质粒 (plasmid) 是存在于细胞质中的一类独立于染色体外的可自主复制的遗传成分， 绝大多数质粒为共价闭合环状 DNA，少数是线性。 质粒不仅仅存在于原核生物中，也存在于真核生物及其细胞器。除了酵母的杀伤质粒是一种RNA 分子外，其他所有质粒均为DNA 分子。质粒的大小为1～200kb, 多数在10kb左右，约为细菌染色体的0.5%～3%。

2. 质粒 DNA 的构型

大多数质粒DNA 是环状双链的DNA 分子，具有三种不同的构型：

①如果两条多核苷酸链均保持着完整的环形结构时，通常呈现超螺旋构型(SC DNA);

② 如果两条多核苷酸链中只有一条保持着完整的环形结构，另一条链出现有一至数 个缺口时，称之为开环 DNA(OC DNA)，此即OC构型；

③若质粒DNA 经过 适当的核酸内切限制酶切割之后，发生双链断裂形成线性分子 (L DNA),通称L 构型。

在琼脂糖凝胶电泳中，不同构型的同一种质粒DNA, 尽管分子量相同，由于插入的溴化乙啶 (EB) 量不同，因而具有不同的电泳迁移率，其中SC DNA的泳动速度最快，OC DNA泳动速度最慢，L DNA居中。